Identification of adenoviruses serotypes implicated in haemorrhagic conjunctivitis in Tunisia
Résumé
Human adenoviruses (ADV) are distributed worldwide; they are associated with a variety of diseases. Some ADV can be implicated in large epidemics of conjunctivitis, gastroenteritis and respiratory infections. Classical diagnosis of ADV infections is based on virus isolation on cell culture and identification of the serotype by neutralization test or hemagglutination inhibition assay. However, these methods have a lack of rapidity that makes them impractical in clinical situations. With the advent of PCR, the diagnosis of ADV was improved. In this work, we have used molecular techniques for the identification of ADV serotypes implicated in conjunctivitis in Tunisia. A total of 199 conjunctival swabs received between October 2000 and May 2005 were investigated. Serotype identification was performed using a PCR followed by restriction enzyme analysis in the hexon gene. Typing by sequencing of the PCR product was used to confirm the serotype identification. Among the 199 tested clinical specimens, 24% were positive for ADV. Two different profiles were observed: one predominant corresponding to the majority of the detected ADV; this profile is in favour of two distinct serotypes, ADV37 or ADV8; the second profile was specific of ADV4 and was found in one case observed in 2005. Sequencing confirmed two serotypes: ADV8 with an endemoepidemically circulation in our country and ADV4 that appeared sporadic. The present work showed the importance of molecular techniques not only for ADV detection but also for identification of the circulating serotypes. These techniques are practical and interesting mainly for the rapid virological investigation during epidemics. (c) 2006 Elsevier Masson SAS. Toes droits reserves.
Les adénovirus humains (ADV) sont des virus à ADN largement répandus dans le monde. Ils sont responsables d'infections très variées, le plus souvent bénignes. Certains ADV ont été incriminés dans des épidémies notamment de conjonctivites, gastroentérites ou d'infections respiratoires. Le diagnostic classique repose sur l'isolement viral sur cellules avec identification du sérotype par séroneutralisation ou inhibition de l'hémagglutination. Cette technique présente des inconvénients tels que le délai long d'obtention des résultats et la lourdeur de la manipulation. Dans ce travail, nous nous sommes proposés d'identifier, par des techniques moléculaires, les sérotypes d'ADV impliqués dans les conjonctivites en Tunisie. Au total, 199 prélèvements conjonctivaux reçus, d'octobre 2000 à mai 2005, ont été investigués. L'identification du sérotype a été réalisée par PCR au niveau du gène de l'hexon suivie d'une digestion enzymatique (RFLP) puis confirmée par séquençage partiel. Un ADV a été détecté dans 24 % des cas par PCR. Deux profils différents ont caractérisé les ADV circulants : un qui serait en faveur d'ADV37 ou 8 et un second spécifique d'ADV4. Le séquençage a permis de confirmer la présence d'ADV8 qui a circulé de façon endémoépidémique dans le pays et d'ADV4 responsable d'un seul cas sporadique. Ce travail constitue une première approche pour l'identification des ADV circulants dans le pays. Il démontre de l'importance des techniques moléculaires aussi bien pour la détection des ADV, mais aussi pour l'identification des sérotypes circulants. Ces techniques permettent une investigation virologique rapide des cas d'où l'intérêt de leur utilisation surtout en cours d'épidémies.
